壓力不穩(wěn)是高壓液相色譜儀(HPLC)zui為常見的故障,總結(jié)原因不外乎以下四種情況:
*種情況【系統(tǒng)沒有穩(wěn)定】:一般是在開機的一段時間內(nèi)出現(xiàn),往往是流動相在色譜柱內(nèi)還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恒定。這些都不屬于儀器問題,只要多平衡一會就會穩(wěn)定。若使用的是梯度程序,由于流動相的比例正處在變化中,壓力也會跟隨變化。
第二種情況【有氣泡】:氣泡的產(chǎn)生是由于流動相中溶解了空氣,在泵壓的作用下空氣會分離出來,氣泡留在泵體內(nèi)排不出去,它不僅影響到流量的準(zhǔn)確,泵壓也會不穩(wěn),這時我們上海色譜網(wǎng)技術(shù)人員只要打開排廢閥,利用快速沖洗功能很快就能將氣泡趕出。
為防止氣泡產(chǎn)生,的辦法就是使用在線脫氣裝置。沒有脫氣機時,流動相要經(jīng)過脫氣處理。超聲波震蕩是常用的除氣泡方法,雖然簡單但效果不佳,不妨將流動相用微孔濾膜多過濾兩遍,利用真空泵的負(fù)壓,將溶解在流動相中的空氣釋放出來,其效果要好些。
如果使用中我們上海色譜網(wǎng)技術(shù)人員發(fā)現(xiàn),連接過濾頭的輸液管中有微小的氣泡流動時,這說明過濾頭有堵塞現(xiàn)象必須清洗,你可用10%的硝酸進行超聲15分鐘,如果還有氣泡產(chǎn)生那就該換新濾頭了。其次,要檢查的是輸液泵有沒有漏液現(xiàn)象,一般接在泵后的管道漏液會使壓力降低,對壓力穩(wěn)定性影響不大。如果泵內(nèi)柱塞墊或柱塞桿磨損了那就不一樣了,它不僅壓力上不去、變化大、流量也不足。只要觀察到泵頭或沖洗管漏液(有沖洗瓶時液位會升高),柱塞墊或柱塞桿肯定有問題。
第三種情況【單向閥出現(xiàn)問題】 :當(dāng)有鹽份或者雜質(zhì)等污染物附著在單向閥內(nèi)球體和閥體表面時,就會破壞密封性,造成輸液的單向性能降低,泵雖然在工作,但就是輸送不好液體,嚴(yán)重時不能輸液。反映到壓力上,表現(xiàn)為嚴(yán)重不穩(wěn)或沒有壓力。這時你可以卸下單向閥,用異丙醇超聲清洗20分鐘。如果有鹽份,再用熱水超聲清洗一遍效果會更好。若清洗后還達(dá)不到要求,可將單向閥再接到流路上用大流量異丙醇沖洗。單向閥的結(jié)構(gòu)比較精細(xì),如果沒有把握先不要分解清洗,用超聲波清洗時要注意擺放的位置防止部件震散,否則裝配后效果會不理想。當(dāng)單向閥內(nèi)的球體損傷時就只有更換了。
第四種情況【泵工作的相位問題】 :這種情況發(fā)生的比較少,可以通過調(diào)節(jié)泵的初始位置解決。